ELISA -test: hvad er princippet?

ELISA -test: hvad er princippet?

Definition: Hvad er ELISA -testen?

Den koblede enzymimmunoabsorptionsassayteknik-på engelsk Enzyme-Linked Immuno Assay-eller ELISA-test er en immunologisk test, der muliggør påvisning eller analyse af molekyler i en biologisk prøve. Det blev konceptualiseret og udviklet af to svenske forskere, Peter Perlmann og Eva Engvall ved Stockholms universitet i 1971.

Molekylerne analyseret ved ELISA -metoden er generelt proteiner. Og prøvetyper omfatter flydende biologiske materialer -plasma, serum, urin, perspirant -, cellekulturmedier eller et rekombinant protein -protein produceret af en celle, hvis genetiske materiale er blevet ændret ved genetisk rekombination -renset til opløsning.

ELISA -testen bruges hovedsageligt i immunologi til at påvise og / eller måle tilstedeværelsen af ​​proteiner, antistoffer eller antigener i en prøve. Denne serologiske test påviser især de antistoffer, som kroppen producerer som reaktion på viral kontaminering.

Princippet for ELISA -testen for infektionssygdomme

Anvendelsen af ​​antistoffer til diagnosticering af infektionssygdomme repræsenterer en specifik og hurtig metode. ELISA-teknikken er en immuno-enzymatisk teknik, der gør det muligt fra en biologisk prøve at visualisere reaktionerne mellem et antigen-et legeme, der betragtes som fremmed af den levende organisme-og et antistof ved hjælp af en farvereaktion frembragt af en enzymmarkør- generelt alkalisk phosphatase og peroxidase - tidligere knyttet til antistoffet. Farvereaktionen bekræfter identifikationen af ​​den isolerede bakterie eller tilstedeværelsen af ​​den ønskede virus, og intensiteten af ​​farven giver en indikation af mængden af ​​antigener eller antistoffer i den givne prøve.

De forskellige typer ELISA -test

Der er fire hovedtyper af ELISA -test:

  • ELISA direkte, gør det muligt at påvise eller måle antistoffer. Det bruger kun et primært antistof;
  • ELISA indirekte, den mest udbredte, gør det også muligt at påvise eller analysere antistoffer. Det bruger et sekundært antistof, som giver det bedre følsomhed end direkte ELISA;
  • ELISA i konkurrence, tillader dosering af antigener. Produceret ved konkurrence om obligationer, bruger det ikke et enzym;
  • ELISA «i sandwich», tillader dosering af antigener. Denne teknik er almindeligt anvendt i forskning.

Brug af ELISA -testen

ELISA -testen bruges til:

  • Find og mål antistoffer i serologi til diagnosticering af infektionssygdomme: virologi, parasitologi, bakteriologi osv .;
  • Dosisproteiner ved lave koncentrationer: specifikke doser af visse plasmaproteiner (immunglobulin E (IgE), ferritin, proteinhormoner osv.), Tumormarkører osv.;
  • Dosis små molekyler: steroidhormoner, skjoldbruskkirtelhormoner, lægemidler ...

De mest almindelige tilfælde: Covid-19, Dengue, HIV, Lyme, allergi, graviditet

ELISA -testen bruges især til at diagnosticere mange infektionssygdomme:

Seksuelt overførte sygdomme (STD'er)

Herunder hepatitis, syfilis, chlamydia og HIV. Anbefalet af sundhedsmyndighederne er det den vigtigste AIDS-screeningstest: den viser tilstedeværelsen af ​​anti-HIV-antistoffer og p24-antigenet seks uger efter infektion.

Regionale eller endemiske sygdomme

Gul feber, Marburg virussygdom (MVM), Ladengue, Lyme sygdom, Chikungunya, Rift Valley feber, Ebola, Lassa feber osv.

Covid-19

For at blive udført mere end 2 til 3 uger efter symptomdebut, gør ELISA-testen det muligt på mindre end en time at identificere tilstedeværelsen af ​​anti-SARS-CoV-2-antistoffer.

Virale patogener, der forårsager prænatale infektioner

Toxoplasmose, rubella, cytomegalovirus, herpes simplex f.eks.

Andre sager

Men han har også fundet applikationer inden for afsløring:

  • Graviditet;
  • Autoimmune sygdomme;
  • Fødevareallergener: den kvantitative bestemmelse af totale immunglobuliner E (IgE) hjælper med at vurdere og behandle allergier;
  • Hormonelle forstyrrelser;
  • Tumormarkører;
  • Plantevira;
  • Og mange flere

Pålidelighed af Covid-19-testen

Som en del af påvisningen af ​​anti-SARS-CoV-2-antistoffer bekræftede en pilotundersøgelse i august 2020 af Institut Pasteur, CNRS, Inserm og University of Paris pålideligheden af ​​ELISA-testen: begge ELISA-test testede brug hele N-proteinet af SARS-CoV-2 (ELISA N) eller virusspidsens (S) ekstracellulære domæne som målantigener. Denne teknik ville gøre det muligt at identificere antistoffer i mere end 90% af tilfældene med en meget lav falsk positiv sats på 1%.

Pris og refusion af ELISA -testen

Elisa -tests udført i analyselaboratorier på recept, koster omkring 10 euro og refunderes med 100% af sygesikringen.

Udført i gratis information, screening og diagnostiske centre (CeGIDD) kan de være gratis for HIV og SARS-CoV-2.

Giv en kommentar