Indhold
- ELISA -test: hvad er princippet?
ELISA -test: hvad er princippet?
Definition: Hvad er ELISA -testen?
Den koblede enzymimmunoabsorptionsassayteknik-på engelsk Enzyme-Linked Immuno Assay-eller ELISA-test er en immunologisk test, der muliggør påvisning eller analyse af molekyler i en biologisk prøve. Det blev konceptualiseret og udviklet af to svenske forskere, Peter Perlmann og Eva Engvall ved Stockholms universitet i 1971.
Molekylerne analyseret ved ELISA -metoden er generelt proteiner. Og prøvetyper omfatter flydende biologiske materialer -plasma, serum, urin, perspirant -, cellekulturmedier eller et rekombinant protein -protein produceret af en celle, hvis genetiske materiale er blevet ændret ved genetisk rekombination -renset til opløsning.
ELISA -testen bruges hovedsageligt i immunologi til at påvise og / eller måle tilstedeværelsen af proteiner, antistoffer eller antigener i en prøve. Denne serologiske test påviser især de antistoffer, som kroppen producerer som reaktion på viral kontaminering.
Princippet for ELISA -testen for infektionssygdomme
Anvendelsen af antistoffer til diagnosticering af infektionssygdomme repræsenterer en specifik og hurtig metode. ELISA-teknikken er en immuno-enzymatisk teknik, der gør det muligt fra en biologisk prøve at visualisere reaktionerne mellem et antigen-et legeme, der betragtes som fremmed af den levende organisme-og et antistof ved hjælp af en farvereaktion frembragt af en enzymmarkør- generelt alkalisk phosphatase og peroxidase - tidligere knyttet til antistoffet. Farvereaktionen bekræfter identifikationen af den isolerede bakterie eller tilstedeværelsen af den ønskede virus, og intensiteten af farven giver en indikation af mængden af antigener eller antistoffer i den givne prøve.
De forskellige typer ELISA -test
Der er fire hovedtyper af ELISA -test:
- ELISA direkte, gør det muligt at påvise eller måle antistoffer. Det bruger kun et primært antistof;
- ELISA indirekte, den mest udbredte, gør det også muligt at påvise eller analysere antistoffer. Det bruger et sekundært antistof, som giver det bedre følsomhed end direkte ELISA;
- ELISA i konkurrence, tillader dosering af antigener. Produceret ved konkurrence om obligationer, bruger det ikke et enzym;
- ELISA «i sandwich», tillader dosering af antigener. Denne teknik er almindeligt anvendt i forskning.
Brug af ELISA -testen
ELISA -testen bruges til:
- Find og mål antistoffer i serologi til diagnosticering af infektionssygdomme: virologi, parasitologi, bakteriologi osv .;
- Dosisproteiner ved lave koncentrationer: specifikke doser af visse plasmaproteiner (immunglobulin E (IgE), ferritin, proteinhormoner osv.), Tumormarkører osv.;
- Dosis små molekyler: steroidhormoner, skjoldbruskkirtelhormoner, lægemidler ...
De mest almindelige tilfælde: Covid-19, Dengue, HIV, Lyme, allergi, graviditet
ELISA -testen bruges især til at diagnosticere mange infektionssygdomme:
Seksuelt overførte sygdomme (STD'er)
Herunder hepatitis, syfilis, chlamydia og HIV. Anbefalet af sundhedsmyndighederne er det den vigtigste AIDS-screeningstest: den viser tilstedeværelsen af anti-HIV-antistoffer og p24-antigenet seks uger efter infektion.
Regionale eller endemiske sygdomme
Gul feber, Marburg virussygdom (MVM), Ladengue, Lyme sygdom, Chikungunya, Rift Valley feber, Ebola, Lassa feber osv.
Covid-19
For at blive udført mere end 2 til 3 uger efter symptomdebut, gør ELISA-testen det muligt på mindre end en time at identificere tilstedeværelsen af anti-SARS-CoV-2-antistoffer.
Virale patogener, der forårsager prænatale infektioner
Toxoplasmose, rubella, cytomegalovirus, herpes simplex f.eks.
Andre sager
Men han har også fundet applikationer inden for afsløring:
- Graviditet;
- Autoimmune sygdomme;
- Fødevareallergener: den kvantitative bestemmelse af totale immunglobuliner E (IgE) hjælper med at vurdere og behandle allergier;
- Hormonelle forstyrrelser;
- Tumormarkører;
- Plantevira;
- Og mange flere
Pålidelighed af Covid-19-testen
Som en del af påvisningen af anti-SARS-CoV-2-antistoffer bekræftede en pilotundersøgelse i august 2020 af Institut Pasteur, CNRS, Inserm og University of Paris pålideligheden af ELISA-testen: begge ELISA-test testede brug hele N-proteinet af SARS-CoV-2 (ELISA N) eller virusspidsens (S) ekstracellulære domæne som målantigener. Denne teknik ville gøre det muligt at identificere antistoffer i mere end 90% af tilfældene med en meget lav falsk positiv sats på 1%.
Pris og refusion af ELISA -testen
Elisa -tests udført i analyselaboratorier på recept, koster omkring 10 euro og refunderes med 100% af sygesikringen.
Udført i gratis information, screening og diagnostiske centre (CeGIDD) kan de være gratis for HIV og SARS-CoV-2.